Selección de tubos y frascos

Compatibilidad química

La compatibilidad química de los materiales de los tubos con el medio de formación de gradiente u otros solventes es una consideración esencial.

  • Las soluciones neutras de sacarosa y sal en general no suponen inconvenientes.
  • Las soluciones alcalinas, tales como aquellas utilizadas para separar las formas de ADN monocatenarias, no deben utilizarse en los tubos y frascos Ultra-Clear™ o de policarbonato.
  • Si se utiliza DMSO para preparar gradientes de sacarosa para la sedimentación del ARN desnaturalizado, los operadores deben usar tubos de polialómero.

Se recomienda evaluar siempre cualquier combinación dudosa de material/medio en las condiciones operativas antes del ensayo real. Las condiciones tales como la fuerza g, la duración del ciclo, etc., pueden producir un efecto considerable en la manera en que el material del tubo rendirá/soportará un solvente particular. La Guía de resistencia química para tubos y frascos de Beckman Coulter ofrece información química detallada.

Los tipos de muestra pueden afectar el material del tubo de diferente manera.

  • El ADN monocatenario o desnaturalizado se adherirá a la superficie de algunos materiales de tubos, lo que requiere el uso de un tubo de polialómero, ya que gran parte de este trabajo se realiza en medios altamente alcalinos incompatibles con el policarbonato.
  • Las separaciones de lipoproteínas generalmente se realizan en tubos súper transparentes Ultra-Clear que se pueden cortar, a fin de simplificar la ubicación y recuperación de la fracción.
  • Los tubos de propionato de celulosa, policarbonato y Ultra-Clear también pueden usarse al recuperar pequeñas muestras de lipoproteínas con un dispositivo de fraccionamiento.

Materiales peligrosos

Extreme las medidas de precaución al centrifugar materiales peligrosos, ya sea patógenos o radioactivos. Se deben tomar todas las posibles precauciones para prevenir cualquier tipo de fuga hacia la cavidad del rotor durante la centrifugación.

Formación de gradiente y fraccionamiento

Al elegir un tubo para un ensayo de gradiente de densidad, se debe considerar la formación del gradiente y el fraccionamiento.

  • Si la visualización óptima de la banda es importante, se deben usar tubos Ultra-Clear o tubos de policarbonato o propionato de celulosa.
  • Si la recolección de banda o zona se realizará por perforación o corte, se necesitará un tubo con pared delgada y flexible.
  • Los gradientes deben cargarse en los tubos plásticos desde abajo hacia arriba para evitar la mezcla.

Centrifugación de alta temperatura

Si bien las centrífugas y rotores modernos pueden funcionar a temperaturas de hasta 45 °C, no se recomienda suponer que todos los tubos pueden funcionar de manera segura por encima de los 25 °C.

  • El acero inoxidable y el vidrio son los únicos materiales que no se deformarán/degradarán al someterse a altas temperaturas y periodos de centrifugación prolongados.
  • Los tubos plásticos se someten a cierto nivel de ablandamiento a temperaturas superiores a los 25 °C. Si a eso se suma la fuerza centrífuga, la duración, el tipo de rotor e incluso el ángulo del tubo, se puede producir deformación.
  • Se recomienda realizar una prueba previa en las condiciones reales del experimento con tubos de agua para determinar cualquier posible resultado negativo.

Tamaños de los tubos

Los tamaños de tubo que se indican en los siguientes gráficos son tamaños nominales y pueden variar con respecto a las capacidades de llenado real. Al procesar un tubo de paredes gruesas sin tapón, el volumen de llenado máximo dependerá del ángulo del tubo. Consulte el manual de instrucciones del rotor para obtener detalles específicos con respecto a los niveles de llenado máximo de los tubos.

Limpieza

Se debe tener especial cuidado durante la limpieza y esterilización de los tubos reutilizables.

  • Todos los tubos deben lavarse a mano con un detergente suave tal como Solution 555™ diluido en 5 partes por 1 o en 10 partes por 1 con agua. No lave los tubos ni frascos en lavavajillas comerciales.
  • Los tubos y frascos de policarbonato no deben exponerse a los detergentes con un pH superior a 8.
  • Si en el procedimiento de limpieza debe usarse un solvente orgánico tal como alcohol o acetona, consulte la Guía de resistencia química para los tubos y frascos de Beckman Coulter, para obtener detalles sobre el material de los tubos y las compatibilidades con los solventes.

Esterilización

  • · El método de esterilización posee un efecto directo en la cantidad de reutilizaciones que uno puede esperar de un tubo.
  • · Los tubos y frascos de polialómero, polietileno y vidrio pueden esterilizarse en autoclave. NOTA: La esterilización en frío es menos nociva y se recomienda para los tubos y frascos de policarbonato y Ultra-Clear.
  • · Siempre seque con aire los tubos, frascos y accesorios. No utilice un horno para secar el equipo de laboratorio u otros accesorios de contención.
  • · Los tubos OptiSeal, Quick-Seal, Ultra Clear y de polialómero de pared delgada son tubos de formato desechable y deben descartarse luego de su uso.

Reutilización

  • · Si se considera la reutilización, se deben seleccionar tubos y frascos de polialómero (preferentemente de paredes gruesas) o de policarbonato, y se deben emplear métodos de esterilización en frío.
  • · El procesamiento de dichos tubos completamente llenos en los rotores de paletas oscilantes permitirá varios usos.
  • · El potencial de deformación permanente aumentará siempre que los tubos se procesen parcialmente llenos, sin tapón o en rotores de ángulo fijo.
  • · Los tubos que se usaron o esterilizaron previamente en autoclave siempre deben inspeccionarse para detectar signos de deformación o agrietamiento.

Cierre de los tubos y practicidad

Cuando se han abordado otras consideraciones, la practicidad puede ser un factor decisivo. Si tiene dudas, el cierre de tubo más conveniente es no usar ningún cierre. No se necesitan cierres para los tubos que se procesan en rotores de paletas oscilantes y en la microultracentrífuga impulsada por aire Airfuge®.

Existen alternativas a los tapones de tubo estándar disponibles para los tubos que se procesan en rotores de ángulo fijo.

  • · Los frascos poseen tapones de tres piezas y son más fáciles de usar que
  • · Los frascos de policarbonato están disponibles para los rotores de ángulo fijo de uso general y se utilizan con frecuencia para la centrifugación diferencial, en la cual la recuperación de banda no es un problema.
  • · Los tubos de paredes gruesas parcialmente llenos pueden procesarse en todos los rotores de ángulo fijo sin tapones (consulte el manual de su rotor para obtener detalles completos sobre los volúmenes de llenado).

Opciones de tubo cerrado

Tubos OptiSeal para un sellado prácticamente sin esfuerzo

  • · Introduzca el conector del tubo y presione.
  • · Las juntas tóricas sellan de manera segura contra la superficie interna del tubo.
  • · La combinación de la fuerza g y la presión hidrostática garantiza un sellado efectivo durante la centrifugación.
  • · Sin herramientas ni piezas mecánicas
  • · Altamente confiable

Tubos Quick-Seal para reducir el tiempo de manipulación a la mitad

Diseño de parte superior curva o tubular para máxima flexibilidad

  • · Los tubos se llenan a través de la abertura curva con una entrada de 3 mm.
  • · Los tubos están termosellados por medio de un sellador manual.
  • · El sello altamente confiable convierte estos tubos en ideales para el almacenamiento de muestras y el trabajo con muestras radioactivas o patógenas.

Nota: Esta información se ha obtenido a partir de una serie fuentes y se proporciona únicamente como guía para la selección de los materiales de los tubos. Las pruebas de funcionamiento a largo plazo a 1 g (a 20 °C) establecieron los datos para la mayoría de los materiales; las reacciones pueden variar bajo el estrés de la centrifugación, o con el contacto extendido o las variaciones de temperatura. Para prevenir las fallas y la pérdida de muestras valiosas, SIEMPRE PRUEBE LAS SOLUCIONES EN LAS CONDICIONES OPERATIVAS ANTES DEL USO.
Advertencia: No utilice sustancias inflamables en una centrífuga en funcionamiento o cerca de ella.