¿Cómo se aíslan y expanden los linfocitos T?

Para obtener linfocitos T para la producción de linfocitos T con CAR, se extrae sangre y se le realiza la leucoféresis para aislar y extraer células sanguíneas mononucleares periféricas (PBMC), p. ej., leucocitos y linfocitos. Los linfocitos T de esta fracción de PMBC se separan usando procesadores de células o separadores de células basados en la centrifugación. Se pueden emplear técnicas mediadas por marcadores de superficie celular (p. ej., la clasificación de células activadas por magnetismo, MACS) para aislar aún más subconjuntos específicos de linfocitos T.1

Se necesita activación sostenida de los linfocitos T para la expansión ex vivo. Esto puede lograrse mediante la coincubación de linfocitos T con células presentadoras de antígenos (CPA) naturales o artificiales. De otro modo, las esferas recubiertas de anticuerpos pueden proporcionar las señales necesarias a los linfocitos T, que se han vuelto populares tanto para seleccionar como para activar los linfocitos T en un solo paso.1

Referencia:
1. X. Wang and I. Rivière, “Clinical manufacturing of CAR T cells: foundation of a promising therapy,” Mol Ther Oncolytics 3:16015, 2016.