Rendimiento y datos de DNAdvance

Aislamiento de ADN genómico de muestras de tejido

El kit DNAdvance es un kit de reactivos de aislamiento de ADN genómico (ADNg) construido con tecnología basada en esferas paramagnéticas de SPRI. Permite la purificación de ADN de alta calidad de muestras de tejido. El kit DNAdvance ofrece una mayor recuperación de ADNg de alta calidad que otros kits de extracción de ADN disponibles comercialmente. La extracción se puede ejecutar manualmente en formato de tubo de 2 ml o en formato de 96 pocillos, o automatizarse en formato de 96 pocillos en diversas estaciones de trabajo genómicas de manipulación de líquidos Biomek de Beckman Coulter.

  • Compatible con aplicaciones basadas en PCR posteriores
  • Rendimiento 3 veces mayor que los productos químicos de extracción de otros proveedores
  • Flujos de trabajo manuales y automatizados disponibles

 

Alta recuperación de ADNg de alta calidad

El ADN genómico se extrajo de 20 mg de tejido hepático utilizando DNAdvance y kits de otros proveedores. [Figura 1] Las muestras se cuantificaron utilizando NanoDrop (Thermo Fisher Scientific). El kit DNAdvance recuperó mayores cantidades de ADNg que los kits de otros proveedores. [Figura 2] Se accedió a las muestras para determinar la pureza utilizando NanoDrop (Thermo Fisher Scientific). Las barras de error representan la desviación estándar de tres réplicas técnicas.

Genómica Genfind v2 Rendimiento del ADN

Figure 1

Genómica Genfind v2 Pureza del ADN

Figure 2

ADNg de alta calidad y alto peso molecular

 

Genómica DNAdvance de tipos de tejido

Figure 3

DNAdvance aísla ADNg de alta calidad. El ADN genómico aislado de 4 tipos de tejido diferentes utilizando DNAdvance se procesó en la cinta de detección de ADN genómico Agilent para evaluar la calidad. Los valores DIN de las muestras aisladas utilizando DNAdvance fueron de alta calidad para todos los tipos de tejido. Gráficos de electrografía de la muestra del ADN extraído de la cola (Figura 4) y el riñón (Figura 5).

Genómica Genfind v2 Rendimiento del ADN

Figure 4

Genómica Genfind v2 Pureza del ADN

Figure 5

Sin arrastre de contaminantes que inhiban la amplificación de la PCR o las aplicaciones posteriores

Genómica DNAdvance Tissue Amplificación del ADN

Figure 6

Figura 6: La capacidad de amplificar el ADN se evaluó mediante qPCR utilizando un conjunto de cebadores (cebador de avance 5'-ggacttcgagcaagagatgg-3' y cebador inverso 5'-agcactgtgttggcgtacag-3') diseñado para abarcar los exones 4 y 5 del gen beta (β) actina (ActB) para producir 327 amplicones de pares de bases. El ADNg aislado de 4 tipos de tejido aislados utilizando el kit DNAdvance era amplificable, indicando que el kit eliminó los inhibidores de la PCR.

 

Extracciones de ADN de una variedad de tipos de tejido

El rendimiento del ADNg de cinco tipos de tejido diferentes. Los rendimientos se cuantificaron utilizando NanoDrop (Thermo Fisher Scientific). Se accedió a la pureza de las muestras utilizando NanoDrop (Thermo Fisher Scientific); las proporciones A260/280 se muestran en las dos últimas columnas y son satisfactorias para aplicaciones posteriores.

Tipo de tejido Rendimiento del ADNg (µg) Pureza del ADN (A260/A280)
Hígado 33,5 1,9
Cerebro 8,07 1,8
Riñón 16,1 1,8
Pulmón 7,28 1,8
Cola 5,38 1,8

 

Flujo de trabajo visual

Genómica DNAdvance Flujo de trabajo 
  1. Lisar el tejido en tampón de lisis y proteinasa K
  2. Unir el ADN a las esferas magnéticas
  3. Separar las esferas magnéticas de los contaminantes
  4. Lavar las esferas magnéticas con etanol al 70 % para eliminar los contaminantes
  5. Repetir el paso de lavado 3 veces
  6. Eluir el ADN de las esferas magnéticas
  7. Transferir a una nueva placa

 

Extracción de ADN de las muestras en menos tiempo con menos movimientos de pipeteo

Genómica Genfind v2 Rendimiento del ADN

Figure 7

Genómica Genfind v2 Pureza del ADN

Figure 8

Métodos de automatización frente a la temporización manual

Tiempo de trabajo y tiempo total estimados en horas necesarios para realizar extracciones de ADN con DNAdvance. El tiempo estimado no tiene en cuenta el paso de lisis durante la noche. El proceso químico se puede realizar manualmente o automatizar en una estación de trabajo Biomek. La tabla representa los tiempos automatizados realizados en una Biomek Serie i multicanal con cabezal de 1200 μl. Se indica la diferencia de tiempo entre los modos manual y automatizado (NR = no recomendado).

DNAdvance Manual Automatizado
Tamaño del lote 8 Tiempo de trabajo 0,25 0,25
Tiempo total 0,50 0,87
24 Tiempo de trabajo 0,25 0,25
Tiempo total 0,50 0,87
96 Tiempo de trabajo NR 0,25
Tiempo total NR 0,87
480 Tiempo de trabajo NR 0,25
Tiempo total NR 2,25
960 Tiempo de trabajo NR 0,25
Tiempo total NR 4,25

 

Productos DNAdvance para el aislamiento de ADN de tejido

El kit de reactivos DNAdvance está disponible en dos tamaños de kit según sus necesidades de rendimiento. Haga clic en el número de pieza específico que aparece a continuación para comprar o solicitar un presupuesto. Para obtener más información, consulte nuestra página de aislamiento de ADN de tejido con DNAdvance.

N.º DE PIEZA NOMBRE PREPARACIONES
A48705 Kit DNAdvance  384
A48706 Kit DNAdvance  9600

 

 

No está destinado ni se ha validado para su uso en el diagnóstico de enfermedades u otras afecciones.
Sólo para uso en investigación. No se debe utilizar en procedimientos con fines diagnósticos.
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