Flujo de trabajo optimizado para el análisis de ciclo celular
Se utiliza un tampón PerFix-nc R1, un reactivo a base de formaldehído, para fijar ligeramente las células a temperatura ambiente, seguido de dos lavados consecutivos que permiten eliminar el exceso de formaldehído.
La permeabilización y cotinción de ADN y proteínas se realiza simultáneamente añadiendo anticuerpos conjugados al reactivo del kit de células que contiene yoduro de propidio y RNasa A, lo que garantiza la eliminación de la señal de las moléculas de ARN de tinción.
No se requieren lavados después de la tinción y la muestra está lista para su adquisición después de 15 minutos de incubación. Este protocolo simplificado reduce el número de pasos a 7 de 11 y reduce el tiempo de procesamiento en un 50 %. La eliminación de los lavados posteriores a la tinción también reduce la pérdida de células que podría producirse durante los pasos de lavado, lo que podría resultar importante para la detección de eventos raros.
Comparación del flujo de trabajo de tinción avanzada del ciclo celular. Representación esquemática del flujo de trabajo clásico frente al flujo de trabajo simplificado utilizando el reactivo de fijación PerFix-nc y el kit de detección de ciclo celular.
