Creación de nuevos experimentos
El software CytExpert separa los experimentos de compensación de color y adquisición de muestras en archivos independientes con las designaciones .xitc y .xit, respectivamente. El investigador puede elegir cuál se ejecuta primero.
Creación de un nuevo experimento (.xit)
- Seleccione Nuevo experimento en el menú Archivo , especifique la ruta del archivo y nombre el experimento o acepte el que trae por defecto, Exp_AAAMMDD-1, y seleccione Guardar.
- Seleccione Establecer canal en el menú Configuración. Seleccione las señales del canal deseado en la casilla de verificación. Escriba el nombre del reactivo en la columna de la etiqueta si lo desea.
- Explore los botones de barra de herramientas para crear gráficos en el espacio de trabajo del experimento. Seleccione un nombre de eje en la gráfica para cambiar el canal que se muestra.
- Para crear compuertas de selección, use los botones de control de la barra de herramientas o haga clic con el botón derecho en la gráfica y seleccione el tipo de compuerta de selección que se necesite.
- Seleccione el área del encabezado de la gráfica para asignar las compuertas a las gráficas necesarias.
- Seleccione Jerarquía poblacional de la barra de herramientas para mostrar la jerarquía de la población. Puede cambiar el color y los nombres de las compuertas haciendo doble clic en el color o nombre en la ventana de jerarquía de la población.
- Seleccione Estadística de la barra de herramientas para mostrar la ventana de estadística. Haga clic con el botón derecho en la tabla de Estadística y seleccione Configuración de la estadística y marque el encabezado, las estadísticas y las poblaciones de interés deseados.
- Seleccione el botón Adq. Configuración en el lateral izquierdo del panel para abrir la ventana de Adq. Configuración y muestre las ganancias del citómetro y la configuración del umbral. En la pestaña de Ganancia , seleccione Recomendada en los casos en los que no especifique sus propios ajustes predeterminados de ganancia de parámetros.
- Importe la matriz de compensación para aplicar los valores de compensación al experimento si es necesario seleccionando Matriz de compensación de la Configuración para recuperar la tabla de la matriz de compensación. Seleccione Importar desde la biblioteca o Importar y localice el archivo de matriz de compensación (.comp) para importarlo. Seleccione la opción deseada para importar la matriz de compensación y la configuración de ganancias. Consulte Compensación de importar y exportar en el módulo de compensación de las IDU de Cytoflex para obtener más información.
Muestreo y recopilación de datos
- Coloque el tubo de muestra en el portatubos para muestras y seleccione Operar para cargar la muestra. En el panel Adquisición, seleccione el flujo y el tipo de flujo de la muestra que desee para los acontecimientos a mostrar, los acontecimientos a grabar y la hora para grabar.
- Ajuste la configuración de ganancia para los diferentes canales en la pestaña de Ganancia en la Adq. Ventana de Configuración o use el botón de Control de ganancias de la barra de herramientas directamente en la gráfica donde aparecen los datos durante la recopilación de datos. Al subir la ganancia, la señal aumenta. Al bajar la ganancia, la señal disminuye.
Nota:Optimice la configuración de ganancias conforme a sus propios objetivos experimentales. La configuración recomendada lo es solo como referencia. - Ajuste la configuración del umbral si es necesario para eliminar el ruido innecesario de señal seleccionando la pestaña Umbral en la ventana Adq. Configuración. Elija el canal para la configuración del umbral e introduzca manualmente un valor en la pestaña del Umbral. Alternativamente, seleccione el botón del Umbral de la barra de herramientas y mueva el ratón hasta la posición de umbral deseada en la gráfica deseada.
- Seleccionar Grabar para guardar los datos y esperar a que termine el proceso de guardado. El soporte del tubo de muestras vuelve a la posición de carga. Añada tubos adicionales a la lista Tubo si es necesario, cargue los tubos y grabe los datos de cada tubo hasta que se hayan recogido todos los datos necesarios.
Identifique estadísticas a exportar con el experimento
La tabla Estadísticas se puede generar seleccionando el icono “Estadística” en la pestaña Espacio de trabajo.
- Una vez que la tabla de estadísticas se haya activado, haga clic con el botón derecho del ratón en la tabla para acceder al menú.
- Seleccione Configuración de estadísticas y escoja las estadísticas, la población y el encabezado que desee mostrar.
- Seleccione Aplicar a todos los tubos en la parte inferior de la ventana Configuración de estadísticas si desea aplicarlas a todas las muestras. Seleccione Aceptar una vez hecho.
- Si desea exportar las estadísticas a una tabla csv, haga clic con el botón derecho en dicha tabla y seleccione Exportar todas las muestras a un archivo CSV. Elija el directorio y guarde el archivo.
- Puede abrir este archivo en Excel y guardarlo además como archivo .xls.
Análisis de datos
- Abra un experimento existente (.xit)
Menú Archivo > Seleccionar archivo FCS, Abrir. Los archivos importados ahora tienen un círculo verde. - Seleccione el icono de análisis en el lado izquierdo de la pantalla
- Utilice herramientas para gráficas según sea necesario para completar el análisis. Gráficas de múltiples datos o de superposición (menú desplegable). Seleccione la herramienta de diamante para rellenar las capas o arrastre y suelte archivos.
Consulte las instrucciones del manual del usuario para el análisis de los datos para ver las instrucciones de uso más detalladas.